Kaedah Saintifik untuk Mengukur NMN dalam Sampel Biologi
1. Pengenalan
Suplemen nicotinamide mononucleotide (NMN) untuk mengawal tahap nicotinamide adenine dinucleotide (NAD +) telah didedahkan sebagai intervensi anti-penuaan yang menjanjikan. Walau bagaimanapun, ia masih merupakan cabaran serius untuk mengukur perantaraan NAD + dengan tepat, NMN khususnya. Kajian ini dikuasakan untuk memperkenalkan kaedah baru, metodologi LC-MS/MS pengantara isotop berganda (dimeLC-MS/MS), untuk kuantifikasi yang tepat NMN dalam sampel biologi.
2. Faktor-faktor yang mempengaruhi pengesanan NMN yang tepat
NMN sukar untuk dikesan dengan tepat kerana kelemahannya kepada degradasi enzimatik, penukaran dalam pemprosesan sampel, tingkah laku kompleksnya dalam keadaan lajur dan pengekstrakan yang berbeza, serta kesan matriks.
Khususnya, NMN mempunyai sifat kekutuban tinggi dan turun naik rendah, yang mudah larut dalam air tetapi sukar larut dalam pelarut organik. Sifat-sifat ini sangat menyekat penggunaan banyak kaedah analisis kuantitatif konvensional.
BSampel iologi Sepertidarah membawa aktiviti penting CD38 dan CD73 (ecto-5’-nukleotidase), kedua-duanya boleh menggunakan NMN sebagai substrat.
Tingkah laku NMN dalam lajur sangat kompleks mungkin kerana sifat dwipartite casnya supaya perbezaan halus dalam pengekstrakan dan keadaan lajur menjejaskan pengesanan NMN yang boleh dipercayai dan tepat dengan ketara.
3. Strategi mengatasi dimeLC-MS/MSuntuk mengurangkan kesan faktor impak
Untuk mengelakkan gangguan faktor yang disebutkan di atas, lajur prototaip NMN-2 digunakan. Lajur ini mengandungi zarah silika ketulenan tinggi berasaskan C18 yang lebih mampu mengikat sebatian hidrofilik daripada zarah karbon, meningkatkan keupayaan pemisahan.
Asid perklorik (PCA) digunakan kerana ia boleh mengekstrak NAD+ dan NMN dengan cekap daripada sampel biologi seperti plasma dengan kerugian minimum.
Untuk melaraskan kesan matriks, jumlah tetap (1 μM) setiap sebatian isotop ditambah kepada sampel biologi sebelum pengekstrakan PCA.
4. Kelebihansdaripada sepeser punLC-MS/MS
Piawaian NMN isotop berganda, NMN (M + 14) dan NMN (M + 5), dalam metodologi dipacu LC-MS/MS boleh mengesan nasib NMN dengan tepat semasa pemprosesan sampel, yang meningkatkan ketepatan dan kebolehpercayaan pengukuran NMN dalam sampel biologi dengan ketara. Selain itu, dimeLC-MS/MS boleh menilai kecekapan pengekstrakan dan kepekatan mutlak NMN dalam pelbagai jenis sampel biologi.
5. Kesimpulannya
ThialahLC-MS/MS baharu-metodologi dipacu dengan piawaian NMN isotop berganda boleh mengukur NMN dengan tepat dan boleh dipercayai dalam sampel biologi.Ia boleh digunakan untuk kajian masa depan mengenai pengambilan NMN.
6. Rujukan
Unno, Junya et al. "Kuantifikasi mutlak mononukleotida nikotinamida dalam sampel biologi dengan kromatografi cecair pengantara isotop-spektrometri jisim tandem berganda (dimeLC-MS/MS)." penuaan npj jld. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Mengapa memilih BONTAC?
BONTAC adalah peneraju global NMN Industri. Kami mempunyai teknologi pemaksisan enzim keseluruhan pertama di China, dan telah menjadi perusahaan terkemuka dalam produk koenzim yang digunakan secara meluas dalam industri kesihatan, perubatan & kecantikan, pertanian hijau, bioperubatan dan bidang lain. Terutama, BONTAC ialah NMN pembekal bahan mentah pasukan David Sinclair yang terkenal di Universiti Harvard. Perkhidmatan dan produk kami boleh dipercayai. Selain itu BONTAC mempunyai pusat penyelidikan teknologi kejuruteraan koenzim bebas di peringkat wilayah di China dan kilang milik sendiri, di mana ketulenan dan kestabilan produk boleh dipastikan.
Penafian
Thialah artikel ialahberdasarkan rujukan dalamjurnal akademik. Maklumat yang berkaitan ialah Menyediakan untuk tujuan perkongsian dan pembelajaran sahaja, dan tidak mewakili sebarang tujuan nasihat perubatan. Jika terdapat sebarang pelanggaran, sila HubungiPengarang BagiDELETion. Pandangan yang dinyatakan dalam artikel ini tidak mewakili kedudukan BONTAC.