Merit Luar Biasa ELISA Ultrasensitif dengan Berbasikal Thio-NAD dalam Menentukan Protein NS1 Denggi

1. Pengenalan

Demam denggi adalah penyakit berjangkit akut yang disebabkan oleh Virus denggimelalui gigitan nyamuk spesies Aedes (Ae. aegypti atau Ae. albopictus) yang dijangkiti, dengan gejala utama seperti demam tinggi, pening, sakit kepala, ruam dan Teruksakit (sakit mata, otot, sendi, atau tulang), dsb. Penyakit ini berleluasa secara meluas di iklim tropika dan subtropika. Dianggarkan 100 hingga 400 juta orang dijangkiti setiap tahun, di mana lebih 80% biasanya ringan dan tanpa gejala. Walau bagaimanapun, demam denggi yang teruk boleh meningkatkan risiko kematian jika tidak dirawat dengan betul. Oleh itu, diagnosis awal penyakit ini adalah penting untuk rawatan tepat pada masanya.

Perlu diperhatikan, protein bukan struktur 1 (NS1), glikoprotein yang sangat terpelihara, terutamanya dirembeskan semasa jangkitan Denggi Virus, yang secara intensif dianggap sebagai faktor patogenesis utama Demam denggi. Oleh itu, NSI biasanya digunakan sebagai biomarker untuk pengesanan awal penyakit ini.

Dalam kajian ini, ujian imunosorben berkaitan enzim sandwic(ELISA)dalam kombinasi dengan thio nicotinamide adenine dinucleotide (thio-NAD/S-NAD) kaedah berbasikal (selepas ini dipanggil ELISA ultrasensitif) digunakan untuk mengesan NSI, diikuti dengan perbandingan dengan NAAT untuk mengesahkan ketepatan pengesannya.

2. Kebaikan dan keburukan kaedah pengesanan tradisional untuk Demam denggi 

Pada masa ini, tBerikut ialah empat kaedah pengesanan utama Bagi Demam denggi.


Pengasingan dan pengenalan virus mempunyai kekhususan yang tinggi tetapi memakan masa, mengambil masa sekurang-kurangnya 5 hari. Ujian antigen pantas adalah yang terpantas dan paling menjimatkan kos di antara kaedah lain, tetapi sensitiviti dan kekhususan agak rendah. Ujian serologi berdasarkan IgM dan IgG dihadkan oleh bilangan hari jangkitan, kerana yang Ujian mesti ditangguhkan sehingga tahap antibodi meningkat ke tahap yang boleh dikesan.

Di klinik, NAAT sering digunakan untuk menentukan Demam denggioleh kotoran kepekaan dan kekhususan yang tinggi. Walau bagaimanapun, kaedah ini mahal, susah payah, dan terdedah kepada positif palsu, yang mesti dijalankan oleh kakitangan terlatih. Untuk mengatasi kelemahan kaedah ini, kaedah pengesanan baru ELISA ultrasensitif ialah digunakan dalam kajian ini.

3. Aliran kerja ELISA ultrasensitif dengan berbasikal thio-NAD

Sepasang antibodi ialahdigunakan untuk menangkap protein NS1 dalam sandwic ELISA, dan fosfatase alkali ialahdilabelkan pada antibodi sekunder. Selain daripada antibodi, derivatif androsteron, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD, dan NADH Akandigunakan untuk membina sistem kitaran enzim thio-NAD. Semasa tindak balas berbasikal thio-NAD, thio-NADH sentiasa terkumpul dalam fesyen nombor segi tiga dan boleh diukur secara langsung pada penyerapan 405 nm.

4. Perbandingan ELISA dan NAAT ultrasensitif dalam pengesanan Protein NS1 Denggi

Dalam NAAT, 60 spesimen adalah denggi positif, dan 25 adalah denggi negatif. Nilai ambang berbasikal (CT) NAAT bagi spesimen positif denggi tersebut adalah antara 12.42 hingga 31.41. Dalam ELISA ultrasensitif, 59 spesimen adalah positif kepada keputusan NAAT, manakala 25 spesimen adalah negatif sepenuhnya kepada keputusan NAAT.

Berbanding dengan NAAT, sensitiviti dan kekhususan ELISA ultrasensitif masing-masing ialah 98.3% dan 100% (Jadual 2). Daripada 60 spesimen pesakit positif denggi yang disahkan NAAT, hanya 1 spesimen negatif dalam ELISA ultrasensitif. Data NAAT menunjukkan bahawa spesimen itu adalah kes jangkitan DENV jenis 4 dengan nilai CT 21.59. Keputusan ELISA ultrasensitif hampir sempurna bersetuju dengan keputusan NAAT, dengan nilai kappa 0.972 (95% CI: 0.917-1.0).

5. Kesimpulannya

Kaedah ELISA ultrasensitif mudah dilakukan dan tidak memerlukan pelatih profesional untuk beroperasi. Pengesanan boleh dimulakan serta-merta selepas menerima sampel kecil. Ia amat sesuai untuk pengesanan awal penyakit Denggi di negara berpendapatan rendah.

Rujukan

Chen, Po-Kai et al. "Kaedah Pengesanan Lanjutan untuk Protein NS1 Denggi Menggunakan ELISA Ultrasensitif dengan Kitaran Thio-NAD." Virus jld. 15,9 1894. 8 Sep. 2023, doi:10.3390/v15091894

Kelebihan dan ciri produk BONTAC Thio-NAD/S-NAD

BONTAC ialah one daripada beberapa perusahaan di Chinayang boleh menghasilkan Thio-NADDengan "Bonzyme"Kaedah enzimatik keseluruhan(mesra alam;tiada sisa pelarut berbahaya) dan teknologi penulenan tujuh langkah "Bonpure" yang unik. BONTAC menggabungkan R&D, pengeluaran dan penjualan, dengan kilang milik sendiri dan beberapa pensijilan antarabangsa untuk memastikan bekalan produk yang berkualiti tinggi dan stabil.

Penafian

BONTAC tidak akan bertanggungjawab ke atas sebarang tuntutan yang timbul secara langsung atau tidak langsung daripada pergantungan anda pada maklumat dan bahan di laman web ini.