Kaedah saintifik untuk mengukur NMN dalam sampel biologi
1. Pengenalan
Suplemen nikotinamida mononukleotida (NMN) untuk meningkatkan tahap nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+) telah didedahkan sebagai intervensi anti-penuaan yang menjanjikan. Walau bagaimanapun, ia masih merupakan cabaran yang serius untuk mengukur perantaraan NAD+ dengan tepat, NMN khususnya. Kajian ini dikuasakan untuk memperkenalkan kaedah baru, metodologi LC-MS/MS pengantaraan isotop berganda (dimeLC-MS/MS), untuk kuantifikasi tepat NMN dalam sampel biologi.
2. Faktor-faktor yang mempengaruhi pengesanan NMN yang tepat
NMN sukar dikesan dengan tepat kerana kerentanannya kepada degradasi enzimatik, penukaran dalam pemprosesan sampel, tingkah laku kompleksnya dalam lajur dan keadaan pengekstrakan yang berbeza, serta kesan matriks.
Secara khusus, NMN mempunyai sifat kekutuban tinggi dan turun naik yang rendah, yang mudah larut dalam air tetapi sukar larut dalam pelarut organik. Ciri-ciri ini sangat menyekat penggunaan banyak kaedah analisis kuantitatif konvensional.
BSampel iologi Sepertidarah membawa aktiviti penting CD38 dan CD73 (ecto-5’-nukleotidase), kedua-duanya boleh menggunakan NMN sebagai substrat.
Tingkah laku NMN dalam lajur adalah sangat kompleks mungkin kerana sifat dwipartit cajnya supaya perbezaan halus dalam pengekstrakan dan keadaan lajur dengan ketara mempengaruhi pengesanan NMN yang boleh dipercayai dan tepat.
3. Strategi mengatasi dimeLC-MS/MSuntuk mengurangkan kesan faktor impak
Untuk mengelakkan gangguan faktor-faktor yang disebutkan di atas, lajur prototaip NMN-2 digunakan. Lajur ini mengandungi zarah silika ketulenan tinggi berasaskan C18 yang lebih mampu mengikat sebatian hidrofilik daripada zarah karbon, meningkatkan keupayaan pemisahan.
Asid perklorik (PCA) digunakan kerana ia boleh mengekstrak NAD+ dan NMN dengan cekap daripada sampel biologi seperti plasma dengan kerugian yang minimum.
Untuk melaraskan kesan matriks, jumlah tetap (1 μM) setiap sebatian isotop ditambah kepada sampel biologi sebelum pengekstrakan PCA.
4. Kelebihansdaripada dimeLC-MS/MS
Piawaian NMN isotop berganda, NMN (M + 14) dan NMN (M + 5), dalam metodologi dipacu LC-MS/MS boleh mengesan nasib NMN dengan tepat semasa pemprosesan sampel, yang dengan ketara meningkatkan ketepatan dan kebolehpercayaan pengukuran NMN dalam sampel biologi. Selain itu, dimeLC-MS/MS boleh menilai kecekapan pengekstrakan dan kepekatan mutlak NMN dalam pelbagai jenis sampel biologi.
5. Kesimpulannya
ThialahLC-MS/MS baharu-metodologi yang didorong dengan piawaian NMN isotop berganda boleh mengukur NMN dengan tepat dan boleh dipercayai dalam sampel biologi.Ia boleh digunakan untuk kajian masa depan mengenai pengambilan NMN.
6. Rujukan
Unno, Junya et al. "Kuantifikasi mutlak nikotinamida mononukleotida dalam sampel biologi oleh kromatografi cecair pengantaraan isotop berganda-spektrometri jisim tandem (dimeLC-MS/MS)." npj penuaan vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Kenapa pilih BONTAC?
BONTAC ialah peneraju global NMN Industri. Kami mempunyai teknologi pemangkin enzim keseluruhan pertama di China, dan telah menjadi perusahaan terkemuka dalam produk koenzim yang digunakan secara meluas dalam industri kesihatan, perubatan & kecantikan, pertanian hijau, bioperubatan dan bidang lain. Terutama, BONTAC ialah NMN pembekal bahan mentah pasukan David Sinclair yang terkenal di Universiti Harvard. Perkhidmatan dan produk kami boleh dipercayai. Selain itu BONTAC mempunyai pusat penyelidikan teknologi kejuruteraan koenzim bebas di peringkat wilayah di China dan kilang milik sendiri, di mana ketulenan dan kestabilan produk dapat dipastikan.
Penafian
Thialah artikel ialahberdasarkan rujukan dalamjurnal akademik. Maklumat yang berkaitan ialah Menyediakan untuk tujuan perkongsian dan pembelajaran sahaja, dan tidak mewakili sebarang tujuan nasihat perubatan. Jika terdapat sebarang pelanggaran, sila HubungiPengarang BagiHapuskanion. Pandangan yang dinyatakan dalam artikel ini tidak mewakili kedudukan BONTAC.