一种量化生物样本中 NMN 的科学方法
1. Pengenalan
Suplemennikotinamida mononukleotida (NMN)untuk meningkatkantahapprekursor NAD teramidanikotinamida adenina dinukleotida (NAD+)telah didedahkan sebagai intervensi anti-penuaan yang menjanjikan. Walau bagaimanapun, ia masihsatu cabaran serius untuk mengukur dengan tepatmetabolit perantara NAD+, NMN terutamanya. Kajian ini bertujuan untuk memperkenalkan kaedah novel, metodologi LC-MS/MS perantara isotop berganda (dimeLC-MS/MS), untuk kuantifikasi tepatNMN dalam sampel biologi.2. Faktor yang mempengaruhi pengesanan tepat NMN
NMN sukar dikesan dengan tepat kerana kerentanannya terhadap degradasi enzimatik,penukaran dalam pemprosesan sampel, tingkah lakunya yang kompleks dalam keadaan kolum dan pengekstrakan yang berbeza, serta kesan matriks.
Secara khusus, NMN mempunyai sifat kekutuban tinggi dan kemeruapan rendah, yang mudah larut dalam air tetapi sukar larut dalam pelarut organik. Sifat-sifat ini sangat mengehadkan aplikasi banyak kaedah analisis kuantitatif konvensional.
Bsampel biologisepertidarah membawa aktiviti ketara CD38 dan CD73 (ekto-5’-nukleotidase), kedua-duanya boleh menggunakan NMN sebagai substrat.
Tingkah laku NMN dalam kolum sangat kompleks mungkin kerana sifat dwipartit casnya sehingga perbezaan halus dalam keadaan pengekstrakan dan kolum memberi kesan ketara kepada pengesanan NMN yang boleh dipercayai dan tepat.
3. Strategi mengatasidimeLC-MS/MSuntuk mengurangkan kesan faktor-faktor yang mempengaruhi
Untuk mengelakkan gangguan faktor-faktor yang disebutkan di atas, kolumprototaipNMN-2digunakan. Kolum inimengandungimengandungiszarah silika ketulenan tinggi berasaskan C18yang lebih berkebolehan mengikat sebatian hidrofilik daripada zarah karbon, meningkatkan keupayaan pemisahan.PAsid perklorik (PCA)digunakan kerana ia bolehmengekstrak NAD+ dengan cekap dan NMN daripada sampel biologi seperti plasma dengan kerugian minimum.
Untuk menyesuaikan kesan matriks,satujumlah tetap (1 μM) setiap sebatian isotopdalamditambah kepadasampel biologisebelum pengekstrakan PCA.
4. KelebihansdimeLC-MS/MS
SPiawaian NMN isotop berganda, NMN (M + 14) dan NMN (M + 5), dalam metodologi berasaskan LC-MS/MS boleh mengesan dengan tepat nasib NMN semasa pemprosesan sampel, yangmeningkatkan ketepatan dan kebolehpercayaan pengukuran NMN dalam sampel biologi secara ketara. Selain itu, dimeLC-MS/MS boleh menilai kecekapan pengekstrakan dan kepekatan mutlak NMN dalam pelbagai jenis sampel biologi.
5. Kesimpulan
Thismetodologi berasaskan LC-MS/MS baharu-dengan piawaian NMN isotop berganda 可以mengukurNMN dalam sampel biologi dengan tepatdan boleh dipercayai.Ia boleh digunakan untuk kajian masa depan mengenai pengambilan NMN. 6. RujukanUnno, Junya et al. “Absolute quantification of nicotinamide mononucleotide in biological samples by double isotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1
Mengapa memilihadalah pemimpin globalBONTAC?
BONTACindustri. Kami mempunyai teknologi katalisis enzim keseluruhan pertama di China, dan telah menjadi perusahaan terkemuka dalamNMNproduk koenzim yang digunakan secara meluas dalam industri kesihatan, perubatan & kecantikan pertanian hijau, biomedik dan bidang lain., Terutama,BONTAC adalahpembekal bahan mentah pasukan terkenal David Sinclair di Universiti Harvard NMN. Perkhidmatan dan produk kami boleh dipercayai. Selain itu,mempunyaiBONTACpusat penyelidikan teknologi kejuruteraan bebasdi peringkat wilayahkoenzim di China dan kilang milik sendiri, di mana ketulenan dan kestabilan produk dapat dijamin dan kilang milik sendiri, di mana ketulenan dan kestabilan produk dapat dipastikan.
