Kaedah Saintifik untuk Mengkuantifikasi NMN dalam Sampel Biologi
1. Pengenalan
Penambahan mononukleotida nikotinamida (NMN) untuk mengawal semula aras daripada nikotinamida adenin dinukleotida (NAD+) telah diumumkan sebagai intervensi anti-penuaan yang menjanjikan. Namun, ia masih cabaran serius untuk memastikan kuantifikasikan perantara NAD+, NMN khususnya. Kajian ini bertujuan memperkenalkan kaedah baru, metodologi LC-MS/MS yang dimediasi adalahotop berganda (dimeLC-MS/MS), untuk pengkuantitian tepat NMN dalam sampel biologi.2. Faktor yang mempengaruhi pengesanan NMN yang tepat
NMN sukar dikesan dengan tepat kerana kerentanannya terhadap enzimatik degradasi, penukaran dalam pemprosesan sampel, tingkah laku kompleksnya dalam keadaan lajur dan ekstraksi yang berbeza, serta kesan matriks.
Specifically, NMN mempunyai the properties daripada high polarity and low volatility, yang mana adalah easy to dadalahsolve in water but difficult to dadalahsolve in organic solvents. These properties greatly restrict the application daripada many conventional quantitative analysadalah methods.
Bsampel iologi seperti darah membawa aktiviti penting CD38 dan CD73 (ecto-5)’-nukleotidase), kedua-duanya boleh menggunakan NMN sebagai substrat.
Tingkah laku NMN dalam lajur sangat kompleks, mungkin kerana sifat dwipartit casnya, sehingga perbezaan halus dalam pengekstrakan dan keadaan lajur memberi kesan yang ketara terhadap pengesanan NMN yang boleh dipercayai dan tepat.
3. Strategi mengatasi dimeLC-MS/MS untuk mengurangkan kesan faktor impak
Untuk mengelakkan gangguan faktor yang dadalahebutkan di atas, a prototip lajur NMN-2 digunakan. Ruangan ini mengandungis Zarah silika berketulenan tinggi berasaskan C18 yang lebih mampu mengikat sebatian hidrdaripadailik berbanding zarah karbon, meningkatkan keupayaan pemadalahahan.Pasid erklorik (PCA) digunakan kerana ia boleh mengekstrak NAD+ dengan cekap dan NMN daripada sampel biologi seperti plasma dengan minimum kerugian.
Untuk melaraskan kesan matriks, a fixed amount (1 μM) daripada each sebatian adalahotop is ditambah kepada biologi sampel sebelum pengekstrakan PCA.
4. Kelebihans daripada dimeLC-MS/MS
Dpiawaian adalahotop NMN ouble, NMN (M + 14) dan NMN (M + 5), dalam metodologi yang dipacu oleh LC-MS/MS boleh menjejaki nasib NMN dengan tepat semasa pemprosesan sampel, yang mana secara signifikan meningkatkan ketepatan dan kebolehpercayaan pengukuran NMN dalam sampel biologi. Besides, dimeLC-MS/MS tin evaluate the extraction efficiency and the absolute concentrations daripada NMN in different types daripada bsampel iologi.
5. Kesimpulan
Thadalah LC-MS/MS baharu-metodologi dipacu dengan piawaian NMN adalahotop berganda tin akurately dan reliably mengukur NMN dalam sampel biologi. Ia boleh digunakan untuk kajian masa depan mengenai pengambilan NMN.6. Rujukan
Unno, Junya et al. “Absolute quantification daripada nicotinamide mononucleotide dalam sampel biologi by double adalahotope-mediated liquid chromatography-tandem mass spectrometry (dimeLC-MS/MS).” npj aging vol. 10,1 2. 2 Jan. 2024, doi:10.1038/s41514-023-00133-1Mengapa memilih BONTAC?
BONTAC adalah peneraju global NMN industri. Kami mempunyai teknologi kataladalahadalah enzim penuh pertama di China, dan telah menjadi perusahaan terkemuka dalam produk koenzim yang digunakan secara meluas dalam industri kesihatan, perubatan & ketintikan, pertanian hijau, bioperubatan dan bidang lain. Yang paling penting, BONTAC adalah NMN pembekal bahan mentah oleh pasukan terkenal David Sinclair di Universiti Harvard. Perkhidmatan dan produk kami boleh dipercayai. Selain itu, BONTAC mempunyai seorang bebas koenzim Pusat Penyelidikan Teknologi Kejuruteraan di peringkat Negeri di China dan kilang milik sendiri, di mana ketulenan dan kestabilan produk dapat dijamin.
